标本采集和运送方法-深圳华晨阳

一、标本采集

（一）血标本。

1．采集出疹后28天内病例静脉血2～3ml，加入到无菌试管中，标明采集日期和病例姓名、编号。

2．有条件地区可用1500rpm/20分钟离心机分离血清。如果没有离心机，在室温下凝固分离血清，或冷藏条件下放置，直到血清完全析出。

3．在无菌条件下，将血清移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中，避免吸到红血球。

4．血清标本运送前应在2～8℃保存，如果7天内不能运送的，应置-20℃以下保存，避免反复冻融。全血标本不能冻结。

5．填写完整的标本送检表，送检表上要注明病例编号。

6．对出疹3天内麻疹IgM抗体阴性者，可于出疹后4-28天再采集第2份血标本。

（二）病原学标本。

采集病原学标本的要求是在暴发疫情早期，至少采集2例（＜10例病例的暴发）或5例（≥10例病例的暴发）新发病例的病原学标本。

1．鼻咽拭子标本

（1）采集出疹前5天至出疹后5天的鼻咽拭子标本。

（2）使用的棉拭子和试管等应灭菌。

（3）用无菌棉拭子适度用力在鼻咽部和咽喉部擦拭，获得上皮细胞。

（4）把拭子放入有外螺旋盖并装有2ml病毒运输液的冻存管中。

（5）病毒运输液有商业成品可用。常用的病毒运输液包括：

pH 7.4～7.6的Hank’s液：在90ml蒸馏水中加入10mlHank’s，然后加入10ml牛血清和0.2ml 0.4%酚红溶液，过滤消毒。加1ml青/链霉素溶液。分装到无菌管中，于4℃储存备用。

组织培养液：DMEM液加入青/链霉素使其终末浓度分别为500～1000IU/ml和500～1000ug/ml，加入胎牛血清使其终末浓度为2％，加入谷氨酰胺至浓度为1％；加入7.5％的NaHCO3调节pH至7.4～7.6。

2．尿标本

（1）采集出疹前5天至出疹后5天内的尿标本10～50 ml。尿液应收集在灭菌容器中，2～8℃保存。

（2）尿中的脱落上皮细胞含有麻疹病毒，通常应在24小时内离心。4℃，转速500g（约1500 rpm），离心5分钟。

（3）弃上清，并用2～3ml病毒运输液悬浮沉淀，置于有外螺旋盖的冻存管中。

（4）在离心悬浮沉淀前不要冷冻尿液。

二、标本运送

（一）血标本。

1．标本采集后应在48小时内送到实验室，严防标本污染或容器渗漏。标本标签应清晰、防水。

2．标本运送时附带标本送检表，送检表上要注明病例编号。安排运送日期并通知实验室，说明标本送达时间。

（二）病原学标本。

1．鼻咽拭子、尿液等病原学标本采集后应立即置2～8℃保存。尿液离心后重悬的沉淀可在2～8℃保存。

病原学标本应尽快送达省级麻疹实验室。48小时内能送达的，可在2～8℃保存，否则-70℃保存。无-70℃保存条件者，可在-20℃保存，但要在1周内送达。在-70℃条件下保存的标本，1个月内送达省级麻疹实验室。

3．标本应在2～8℃运输，严防标本污染或容器渗漏。

4．标本保存和运送过程应避免日光照射。

5．其他送检要求与血清标本相同。